澄邁縣痰檢實驗室

痰檢實驗室操作規(guī)程

一、檢查程序

（一）痰標本收集：在三個痰標本盒上注明病人的姓名、編號、檢查日期和容器序號。病人shou次留痰前應指導病人，留取“即時痰”、“夜間痰”、“晨痰”合格的痰標本，對所送不合格痰標本除常規(guī)檢查外，應要求患者重新送檢，合格的痰標本包括干酪痰、血痰、粘液痰。唾液或口水用于病人確診時為不合格痰標本，標本量一般在3～5 ml。

（二）痰涂片制作：

1、檢查前對新的玻片用95%的乙醇擦拭脫脂，經干燥、清潔、檢查無油污、無劃痕后作為合格的玻片備用。在已經準備的痰玻片背面左端的1/3處注明編號，挑取痰標本中可疑部分約0.05～0.1 ml，于玻片正面右側2/3處，均勻涂抹成10×20 mm的卵圓形痰膜。

2、痰膜朝上靜置自然干燥后(一般約需要30分鐘)進行染色鏡檢。當氣溫低，痰膜不易干燥時，嚴禁將玻片直接在火焰上烘拷，以防產生氣溶膠或痰膜脫落。一張載玻片上只能涂抹一份痰標本，一張載玻片只能使用一次，不得清洗后再次用于痰涂片染色檢查。

3、涂抹完畢后的痰標本，在檢查結果報告前，應暫時保留。以備涂片、染色不合格影響鏡檢結果時，重新涂片和染色之用。

4、萋－尼氏染色油鏡檢查.

（三）實驗室登記：按照年度病人序號和痰標本序號在實驗室登記本上進行登記，并以同樣的號碼在痰涂片檢查單上進行標記。檢驗單的病人姓名應與實驗室登記本一致。

（四）痰涂片檢查結果登記與報告：及時在登記本上登記痰涂片檢查結果。當病人的三次痰涂片檢查完成后，發(fā)現(xiàn)有陽性痰涂片，應在規(guī)定時間內報醫(yī)院防保科，縣級結核病防治機構再對痰涂片進行確認。

（六）痰涂片的保存：每個查痰點鏡檢后的全部痰涂片應按實驗室登記本序號連續(xù)排列，分別存放在各點固定的玻片盒中，供上級實驗室復核確認。

（七）痰檢質量控制：每個痰涂片檢查點均按照中國結核病防治規(guī)劃《痰涂片鏡檢質量保證手冊》的要求，作為一個獨立的被質控單位接受室間質量評估和檢查工作。

二、萋－尼氏染色

1、涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片間距保持在10 mm以上的距離；火焰固定(在5秒鐘內將玻片置于火焰上來回烘烤4次)。

2、滴加石碳酸復紅染液，蓋滿痰膜，火焰加熱至出現(xiàn)蒸汽后，脫離火焰，保持染色5分鐘。染色期間應始終保持痰膜被染色液覆蓋，必要時可續(xù)加染色液。加溫時勿使染色液沸騰。

3、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去染色液，瀝去標本上剩余的水。

4、自痰膜上端外緣滴加脫色劑布滿痰膜，脫色1分鐘；如有必要，需流水洗去脫色液后，再次脫色至痰膜無可視紅色為止。

5、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去脫色液，瀝去玻片上剩余的水。

6、滴加亞甲藍復染液，染色30秒鐘。

7、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去復染液，瀝去標本上剩余的水。待玻片干燥后鏡檢。

一張染色合格的痰玻片，由于被亞甲藍染色而呈亮藍色。將染色后的玻片放置在報紙上，如果報紙上的文字透過痰膜不能被看清，表明該玻片涂抹過厚。